ホルトフレーター液は、カエルなどの両生類の胚や組織を扱う際に使用される生理食塩水の一種です。この溶液は両生類の体液と浸透圧が近くなるように設計されており、胚の発生実験などで用いられます。

一般的なホルトフレーター液の成分　（１リットル当たりの標準的な組成）

塩化ナトリウム（NaCl）　 3.5 g
塩化カリウム（KCl）　　 0.05 g
塩化カルシウム（CaCl₂） 0.1 g
炭酸マグネシウム（MgCO₃） 微量（溶液のpHを調整するため）

作り方のポイント
①　成分を適切な順番で純水に溶かします。
②　pHを調整する場合は、通常 pH 7.0 - 7.4 （胚や組織に適した範囲）に保ちます。
③　濾過や滅菌を行う。

顕微鏡で動物組織の細胞の状態を観察するために、動物組織を薄く切って張り付けたプレパラート（標本プレパラート）を作成する必要があります。 大学の研究室や病院の病理検査室には、組織観察用のプレパラートを作成するための機器（ミクロトーム）があります。有尾研でも、生殖器官の年変化などを調べるために標本プレパラートを作成します。 今日は、これまでミクロトームの使って標本を作成した経験のある高校3年生が、下級…続きを見る

EDTAの正式名称は、Ethylenediaminetetraacetic acid（EDTA・2K　分子量=404.25）です。 EDTAは金属イオン（2価）のキレート剤として有名です。キレートとは「錯体」と呼ばれる結合状態を金属イオンとの間で作ることで金属イオンをあたかもEDTA内に吸収してしまう状態をいいます。 つまり、EDTAは溶液中の金属イオンを根こそぎ奪っていく性質をもっているというこ…続きを見る

水道水の塩素を抜くために、いつもは汲み置き水にエアーを入れてブクブクさせるのが最もいいですが、手早く塩素を抜くにはカルキ抜きとしてハイポ（チオ硫酸ナトリウム・5水和物）を水道水にいれます。 水道水に適量を入れて、5分程度待てば、魚類に無害な飼育水になります。 チオ硫酸ナトリウムの適量は、結晶の粒を18ℓまでの水槽に１，２個。23ℓ水槽に２，３個。60ℓ（60Cm水槽）に５，６個です。 …続きを見る

サイエンスクラスの生徒の課題研究が１学期はなかなか時間が取れずに、進展しなかった。さらに、7月になって、指導する私が心不全とコロナ感染で5週間も入院してしまったのだから、手の施しようがなかった。とにかく、生徒には、私が3月に持ち込んだ動物たち（オオイタサンショウオとアカハライモリ、アマミシリケンイモリ）の世話をしてもらい、負担をかけただけだった。 大学の自分の研究室から顕微鏡や超低温冷蔵庫、インジ…続きを見る

本がよく売れて、在庫がなくなりつつあるのですが、再販はコストの面で合わないとようで、デジタル版（CD版）が出版社から執筆者に送られてきました。 EPUB版の方はアマゾで発売されるということです。PC用の専用アプリ上で閲覧可能で、タブレットでの利用に便利なようにしてあるということです。 2020年9月17日発行　生物の科学遺伝別冊No.24「実践生物実験ガイドブック・実験観察の勘どころ」（エヌ・テ…続きを見る

アカハライモリの精巣のシッフ染色画像 DNAを含むデオキシリボースを塩酸で処理して生じるアルデヒド基をシッフ試薬で発色させる方法で核酸を染色する。 【必要な試薬】 ①　5NのHCl：市販の濃塩酸を水で2.4倍にする。 ②　シッフ試薬：0.5g塩基性フクシンを100mℓの水に溶き、沸騰するまで熱する。室温まで冷却させてから1NのHClを10mℓ加え、さらに異性重硫酸カリウム（K2S2O5）を１g加…続きを見る

雑誌「生物の科学・遺伝」別冊のNo.24として、『実践生物実験ガイドブック』が出ました。 内容は以下のとおりです。 ［Part I］観察実験の基本操作の確認と工夫 光学顕微鏡 ──その基本的な使い方と注意点のおさらい 　　大川 均（大妻嵐山中学校・高等学校 教諭） 実体顕微鏡下で両手でピンセットを操作する練習課題 　　薄井 芳奈（KOBEらぼ♪Polka） モバイル顕微鏡の過去・現在・未来 　　佐…続きを見る

C:\Users\（ユーザー名）\AppData\Roaming\Thunderbirdというフォルダが必要です。Appdataというフォルダは不可視なので，見つけるのに手順が必要です。 【手順】 エクスプローラーで，Cドライブをダブルクリック→「ユーザー」フォルダをダブルクリック →自分のユーザー名のフォルダをダブルクリック ここまででドキュメントやデスクトップ，ダウンロードなどのフォルダが表…続きを見る

生物準備室にある実験機材は、オートクレーブ、インキュベータ（ペルチェ素子）、実体顕微鏡、位相差顕微鏡、微分干渉顕微鏡、マイクロフォージ、プーラーです。 実験スペース オートクレーブ（滅菌） 生物準備室（実験資料閲覧） …続きを見る

イモリの未受精卵を付活させるために使用する精子細胞質抽出液を山口大学で大学院生に手伝ってもらって作成した。イモリ約70匹から精子を絞りだして、遠心分離、ホモジェナイザーで破砕、遠心分離して最終的な組織液を採取した。 …続きを見る

①1.5％のチオグリコール酸ナトリウム液をMSSで作る（長期保存可能）。 ②直径6cmのペトリ皿に卵を集め、水を捨てる。 ③①の液を8～10ml加え1N-NaOHを先端直径2mm以上のパスツールピペットで3滴（約150μl）加えて、皿をよく揺らす。 ④1分以内にカプセルの一部が溶け、卵が飛び出すので、MSSで素早くよく洗う。 ⑤胚は受精膜に包まれているので、1/5MSSや汲み置きの水道水中で、滅菌…続きを見る

の略。カエル幼生の生理的食塩水の一種で、スタインバーグによって考案された溶液を改良したものである。組成は、58.2 mM NaCl，0.67 mM KCl，0.34 mM、Ca(NO3)2，0.83 mM MgSO4，3.0 mM HEPES（pH 7.5）を含む。作り方は、上記の成分を蒸留水に溶かし、１N のNaOH 溶液でpH 7.5 にする。これを希釈して10％MSS、50％MSSをつくる。…続きを見る

システイン3g、NaOH1gに蒸留水100mlを加えて溶かす。ほぼ、pHは8.5になる。Trisとは2-アミノ-2-ヒドロキシメチル-1,3-プロパンジオールのことである。…続きを見る

両棲類の幼生の整理水として使用する。58mM NaCl, 0.67mM KCl, 0.34mM Ca(NO3)2, 0.85mM　MgSO4,4.6mM Trisの濃度にし、塩酸でpHを7.4にする。…続きを見る

両生類の成体用の生理水として使用する。110.3mM NaCl, 1.3mM KCl, 1.3mM CaCl2、5.7mMTris、の濃度にし、塩酸でpHを7.4にする。…続きを見る

1)ブアン固定 2)70%エタノ－ル（洗浄のみ） 3)70%エタノールと炭酸リチウム飽和液（2，3滴)（overnight） ※この段階で処理を止めて、70%エタノールで保存できる。 4)94%エタノール（30min） 5)99%エタノール（30min） 6)酢酸イソアミル（overnight） 7)酢酸イソアミル（24h） 8)レモゾール（45min） 9)レモゾール（45min） 10)レモゾ…続きを見る

1.組織の切り出しとトリミング ・固定液が染み込むように、4mm四方くらいの小さな塊に切り出す。 2.固定 1)Bodianll固定液を調合する。 80％エタノール：ホルマリン：氷酢酸　＝　18：1：1 2)固定は室温で2～6時間 4mm四方の小さな組織で2時間は必要、30minでは染色されない。固定８時間でも染色されるが、固定2時間の場合より染色が若干の劣る。 3.脱灰 1)【脱灰】プランク・リ…続きを見る

イモリの生きた胚の観察は，外側のカプセルをチオグリコール酸ナトリウム液で除去することによって形態観察がしやすくなる。Steinberg液でつくったチオグリコール酸ナトリウ1.5％溶液５mlに卵を浸し，　１ＭのNaOH溶液を２滴加えて緩やかに揺すると，卵がカプセルから飛び出す。飛び出した卵を，すばやくSteinberg液でよく洗う。この操作によって，胚を受精膜だけの状態にできる…続きを見る

両生類の卵黄が多い胚の固定液。A液（重クロム酸カリウム0.5gを蒸留水87.5mlに溶かしたもの）とB液（ホルマリン10mlと酢酸2.5mlを混ぜたもの）を使う前に混合ししてから、標本を入れて一昼夜固定する。重金属を含むことから使うことは避けたい、また廃液の処理に気をつけることが必要である。…続きを見る